問題詳情

29. 下列對定量即時逆轉錄聚合酶鏈反應測定 (quantitative real-time reverse transcription
polymerase chain reaction assay, qRT-PCR) 的描述,下列何者最不正確?
(A) 該方法廣泛用於人類新冠肺炎 (Covid-19) 檢體的篩檢
(B) 該方法通常是以 RNA 為起始分析物質
(C) 該方法通常使用螢光技術,反映特定基因 (DNA 片段) 產物的生成量
(D) 該方法在現代仍常需要依賴 DNA 凝膠電泳技術

參考答案

答案:D

統計:A:13,B:15,C:32,D:114,E:0

難度:簡單

用户評論

炸蝦】評論

(D)還不會 麻煩其他人解答~ RT-PCR:一條RNA鏈被反轉錄成爲互補DNA,再以此爲模板透過PCR進行DNA複製。 聚合酶連鎖反應(Polymerase Chain Reaction, PCR)利用DNA雙鏈複製的原理,在生物體外複製特定DNA片段的核酸合成技術。透過這項技術,可在短時間內大量擴增目的基因,而不必依賴大腸桿菌或酵母菌等生物體1.DNA 模板:雙股螺旋DNA 經高溫解離成單股DNA,作為PCR 反應的模版。以一般反應體積為50uL 而言,只需1~100ng 的DNA 就非常足夠了,太多的DNA 反而會降低反應的專一性。2.Primer 引子:功能就像衛星導航一樣,能找到目標基因片段的頭、尾兩端。一般反應濃度約為0.2~0.4uM,太高或太低都不恰當,濃度太高時會降低反應的專一性,太低時反應就會失敗。3.DNA Polymerase 聚合酶:能將4 種核酸原料(dNTPs:dATP、dTTP、dCTP、dGTP)(dATCG)依照DNA 模板密碼,正確地一個一個地加上去,而合成新的ㄧ股基因片段。聚合脢的種類繁多,依其特性大致上可區分成一般聚合脢(Taq)、熱啟動(Hot-Start)聚合脢、校正(Proofreading)聚合脢三類。4.MgCl2氯化鎂:可提供鎂離子作為聚合酶的輔因子,輔助聚合脢作用。一般都使1.5~2.0mM。若濃度太高,雖然可以增加PCR的產量,但是專一性會大幅降低;若濃度太低,則PCR 產量會大幅降低。5.緩衝液:主要是由Tris、KCl 所調配成的緩衝液,pH 約8.4

uu(已上榜)】評論

(D)qRT-PCR不需要DNA凝膠電泳,而是用螢光技術來進行即時監測和定量

anlulu】評論

qRT-PCR技術取RNA先以逆轉錄酶(reverse transcriptase)作成互補 DNA(complementary DNA, cDNA),再利用專一的Primer probe(引子探針)在PCR(聚合酶連鎖反應)過程中產生螢光,使用螢光偵測系統來偵測每個循環(cycle)所釋放出的螢光量,推算出的產物含量,達到即時定量的目的。 不需要DNA 凝膠電泳技術(利用 DNA 分子在電場中的遷移速度差異來分離和分析 DNA 的方法)source:2019-nCoV (COVID-19) 感染的篩檢及鑑定 | 科學Online (ntu.edu.tw)