問題詳情
72. The molecular weight of Protein A (pI = 4.0), B (pI = 6.8), and C (pI = 8.5) is 14 kDa, 24 kDa,and 30 kDa, respectively. All of them are monomer proteins. Which of the following statementsis CORRECT?
(A) Protein A elutes out first, when you use gel filtration column to separate the mixture ofthose three proteins.
(B) Protein C is the one that moves fastest, when you separate the mixture of those threeproteins by SDS-PAGE.
(C) As shown in the right figure, you can use thisisoelectric focusing apparatus to separatethose three proteins.
(D) When you use a DEAE ion exchange column and 10 mM Tris-Cl, pH 7.0 buffer toseparate these three proteins, Protein A will be bound by this column.
(E) None of the above
參考答案
難度：計算中-1
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用户評論
【柯韋安】評論
根據我查詢到的資訊，以下是對各選項的詳細解釋：(A) 選項：膠體過濾柱分離這三種蛋白質時，蛋白質A會首先洗脫出來。解釋：這個選項是不正確的。膠體過濾柱分離是根據蛋白質的分子大小來進行分離的，分子大小最大的蛋白質會首先洗脫出來。因此，分子量最大的蛋白質C（30 kDa）會首先洗脫出來，而不是蛋白質A（14 kDa）。(B) 蛋白質C是在SDS-PAGE分離這三種蛋白質的混合物時移動最快的。解釋：這個選項也是不正確的。SDS-PAGE是根據蛋白質的分子大小來進行分離的，分子大小最小的蛋白質會移動最快。因此，分子量最小的蛋白質A（14 kDa）會移動最快，而不是蛋白質C（30 kDa）。(C) 如右圖所示，你可以使用這個等電點聚焦裝置來分離這三種蛋白質。解釋：這個選項是不正確的。等電點聚焦是根據蛋白質的等電點（pI）來進行分離的。雖然這三個蛋白質的等電點（pI）都不相同，但是這三個蛋白質的分子量也不一樣，而且擁有最大等電點的蛋白質A卻有最小的分子量、而擁有最小等電點的蛋白質C卻有最大的分子量，分子量大小跟等電點會同時影響蛋白質在膠體中的移動速度，因此是否能成功分離無法判斷。(D) 當你使用DEAE離子交換柱和10 mM Tris-Cl，pH 7.0緩衝液來分離這三種蛋白質時，蛋白質A會被這個柱綁定。解釋：這個選項是正確的。DEAE是一種陽離子交換樹脂，會吸附pH值低於緩衝液pH值的蛋白質。在pH 7.0的緩衝液中，只有pI值低於7.0的蛋白質A（pI = 4.0）會帶正電，因此會被DEAE柱綁定。(E) 上述皆非解釋：這個選項是不正確的，因為選項(D)是正確的。故本題答案為 (D)。資料來源：https://en.wikipedia.org/wiki/Size-exclusion_chromatographyhttps://en.wikipedia.org/wiki/SDS-PAGEhttps://en.wikipedia.org/wiki/Isoelectric_focusinghttps://en.wikipedia.org/wiki/Ion-exchange_chromatography