【用戶】心猿意馬來貘
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【評論內容】OLA是通過設計兩種能與靶序列DNA精確並列雜交的寡核苷酸完成的。寡核酸雜交後,DNA連接酶可使其正常配對的相鄰鹼基共價連結,而錯配的相鄰鹼基可通過調節連接酶和NaCl濃度防止其連接,連接產物可通過凝膠電泳觀察其大小,或通過5’端修飾技術使一個寡核苷酸5’端带有一个配基。連接後,通過固相化的親和配基使其固定,漂洗後,檢測另一寡核苷酸3’端攜帶的適當標記分子。這一過程如重複進行多個循環,則連接產物會呈線性增加,故稱這循環進行的OLA為連接檢測反應(LDR)。此反應中若再加入兩種與上述寡核苷酸互補的寡核苷酸互補的寡核苷酸進行循環的連接反應,則稱之為連接酶鍊反應。