問題詳情

50.在變性梯度膠體電泳法（Denaturing gradient gel electrophoresis, DGGE）中，通常要在其中一條PCR引子的 5' 端接上何種結構的分子，以避免在高濃度的變性劑存在下，所有的DNA皆變成單股？
(A)GC clamp
(B)AT clamp
(C)Poly-A
(D)5' cap

參考答案

答案：A
難度：適中0.603604
統計：A(134),B(10),C(28),D(50),E(0)

用户評論

【PPMTPASS】評論

GC rich的區域，melting temperature比較高，雙股較難分開

【心猿意馬來貘】評論

DGGE是藉由分離PCR產物來區別PCR擴增的區域中是否有變異或突變產生。DNA即使有變異存在，但是PCR反應的產物長度相近，傳統電泳可能只出現相同位置的single band而無法區別。DGGE膠體添加formamide和urea作為變性劑。DNA進入膠體隨著變性劑濃度增加，DNA開始由解離溫度較低的區域(一般是AT含量較高的區域)開始解離，形成部分單股導致移動速度變慢。電泳結束染色觀察。若遇分析的DNA分子Tm值較低容易剛開始就完全解離成單股導致解析度變差。故在其中一條的5’端添加30~40個核苷酸長度的CG鹼基，稱為CG夾子(CG clamp)Tm值較一般DNA高