【濃湯】評論

內部具有網狀篩孔，利用球狀凝膠內的篩孔，使分子流過填充凝膠的管柱時，大分子無法進入凝膠篩孔，而只流經凝膠及管柱間的孔隙，很快就可以流出管柱，較小的分子因為進入凝膠內的篩孔，故在管柱內的停留時間較長，由此區分大小不同的分子，亦可與已知大小的分子作比較而定出一

【寶寶東】評論

Gel filtration chromatography 主要是根據蛋白質的大小和形狀(質量)來進行分離和純化。第一個沖提出的蛋白會是分子量最大的，第二個則是第二大的，以此類推。蛋白質純化技術整理(a)粗蛋白質(crude extract)以超音波震盪或使用均質儀等方法，將細胞打破,多使用鹽析法以取出蛋白質，可以粗略去除蛋白質以外的物質離心法(ultracentrifugation)(b)鹽析(salt out)用硫酸銨(Ammonium sulfate)使所有蛋白質沉澱(c)膠體過濾法(gel filtration)-用來測定蛋白質分子量其固定相是由帶有細小孔洞的膠球所組成的，當樣本分子隨著流動相流過固定相時，小分子較大分子易於流進膠球的孔洞中而較慢流出(d)離子交換層析法(ion-exchange chromatography)利用各分子間帶電荷量的不同來做篩選分析依據陽離子交換層析：固定相帶有負電荷，帶正電荷的蛋白質會與固定相交互作用而移動速度變慢，帶負電荷越多的會越先流出來陰離子交換層析：固定相帶有正電荷(e)親和性圓柱層析法(affinity chromatography)純化能力最高利用glutathione S-transferase(GST)融合的多胜肽來進行分離(His)6-tag融合的多胜肽來進行分離利用抗體來進行分離(f) SDS-PAGE利用檢體中蛋白質分子量大小的不同，使其在電泳膠中分離。是最常用的蛋白質分析技術之一SDS為界面活性劑會破壞蛋白質的二級結構使其變性，並包覆變性蛋白質，使其帶有一致的負電荷和一致的形狀（長條形）。進行電泳時，分子量較小的較容易落下，相反的分子量較大的則卡在起點附近。(g)等電點聚焦電泳法(IEF)Ampholyte 是一種混合物，含有各種連續 pI 的小分子。 若在聚丙烯醯胺膠體內加入 ampholyte，通電後 ampholyte 會在膠體中形成一 pH 梯度；當樣本中的蛋白質泳動至相等於其 pI 的 pH 位置時，其淨電荷會變為零 (pH = pI)，因而焦集於該處不動。因此 IEF 是依樣本分子 pI 的不同來作分離，其解析度非常好。

【7you】評論

gel filtration chromatography 介紹:大分子流經凝膠和館柱間大空隙較  快流下來小分子進入凝膠篩孔雲遊較 慢流下來所以 第二個沖提出的蛋白 >> 分子量第二大 類比....http://www.bio.fju.edu.tw/teaching-excellence-project/content04/html/41.htm