用戶【寶寶東】點評問題和點評內容

【評論主題】2.以凝膠過濾層析法(gel filtration chromatography)方式分離下列蛋白,何者為第二個沖提出的蛋白?(A)蛋白A(62 kDa) (B)蛋白B(105 kDa) (C)蛋白C

【評論內容】

Gel filtration chromatography 主要是根據蛋白質的大小和形狀(質量)來進行分離和純化。

第一個沖提出的蛋白會是分子量最大的,第二個則是第二大的,以此類推。

蛋白質純化技術整理

(a)粗蛋白質(crude extract)

以超音波震盪或使用均質儀等方法,將細胞打破,多使用鹽析法以取出蛋白質,可以粗略去除蛋白質以外的物質離心法(ultracentrifugation)

(b)鹽析(salt out)

硫酸銨(Ammonium sulfate)使所有蛋白質沉澱

(c)膠體過濾法(gel filtration)-用來測定蛋白質分子量

其固定相是由帶有細小孔洞的膠球所組成的,當樣本分子隨著流動相流過固定相時,小分子較大分子易於流進膠球的孔洞中而較慢流出

(d)離子交換層析法(ion-exchange chromatography)

利用各分子間帶電荷量的不同來做篩選分析依據陽離子交換層析:

固定相帶有負電荷,帶正電荷的蛋白質會與固定相交互作用而移動速度變慢,帶負電荷越多的會越先流出來

陰離子交換層析:

固定相帶有正電荷

(e)親和性圓柱層析法(affinity chromatography)

純化能力最高利用glutathione S-transferase(GST)融合的多胜肽來進行分離(His)6-tag融合的多胜肽來進行分離利用抗體來進行分離

(f) SDS-PAGE

利用檢體中蛋白質分子量大小的不同,使其在電泳膠中分離。是最常用的蛋白質分析技術之一SDS為界面活性劑會破壞蛋白質的二級結構使其變性,並包覆變性蛋白質,使其帶有一致的負電荷和一致的形狀(長條形)。進行電泳時,分子量較小的較容易落下,相反的分子量較大的則卡在起點附近。

(g)等電點聚焦電泳法(IEF)

Ampholyte 是一種混合物,含有各種連續 pI 的小分子。 若在聚丙烯醯胺膠體內加入 ampholyte,通電後 ampholyte 會在膠體中形成一 pH 梯度;當樣本中的蛋白質泳動至相等於其 pI 的 pH 位置時,其淨電荷會變為零 (pH = pI),因而焦集於該處不動。因此 IEF 是依樣本分子 pI 的不同來作分離,其解析度非常好。

【評論主題】30.利用MDRD(Modification of Diet in Renal Disease)及CKD-EPI(Chronic Kidney Disease EpidemiologyCollabor

【評論內容】參考自原文:(1)光田醫學雜誌 第 5卷 ★ 9★...

【評論主題】17.微量元素在血液內的含量,常以下列何種單位表示?(A)pg/dL (B)µg/kg (C)µg/dL (D)ng/dL

【評論內容】以銅離子(其中一種微量元素)及Menke☆ ...

【評論主題】18.內呼吸(internal respiration)主要發生在下列那個位置?(A)支氣管 (B)肺泡管 (C)肺泡微血管 (D)組織微血管

【評論內容】內部交換(內呼吸):供應細胞所需的氧氣,...

【評論主題】2.經由耳鏡檢查下列那一部位,可判斷是否罹患中耳炎?(A)圓窗 (B)半規管 (C)耳咽管 (D)鼓膜

【評論內容】中耳的主要結構是鼓膜、鼓室和三個聽小骨(...

【評論主題】19.下列何者是myeloproliferative neoplasm最常見的JAK2(Janus kinase 2)突變?(A)K539L (B)V617F (C)H538Q (D)E543L

【評論內容】

Chronic myeloprol☆☆☆☆☆☆☆☆☆ ...

【評論主題】76.與烏腳病的發生最有關係的有毒元素為:(A)鉛(Pb) (B)砷(As) (C)鎘(Cd) (D)汞(Hg)

【評論內容】1.     砷Arsenic (As) :★★★2....

【評論主題】54.下列何者不適合當作Myocardial injury的生物標誌?(A)Creatine kinase-BB (CK-BB) (B)Cardiac troponins T (cTnT) (C)Hi

【評論內容】Creatine kinase-BB C☆★★★★★★★★(...

【評論主題】44.下列何種血清酵素在Paget disease患者會上升?(A)Alanine aminotransferase (B)Alkaline phosphatase (C)γ-Glutamyltran

【評論內容】原發性變形性骨炎  ( Primary ☆☆☆☆☆ ...

【評論主題】40.脂蛋白(Lipoprotein)分類是依照何種分子特性?(A)密度 (B)蛋白組成比例 (C)質量 (D)生合成的位置

【評論內容】血液中脂蛋白依密度高低,區分為極低密度脂...

【評論主題】34.下列何者不是胰島素的功能?(A)促進蛋白質合成 (B)促進酮酸合成 (C)促進脂肪合成 (D)促進肝醣合成

【評論內容】-酮體的生成主要與醣類及脂肪的生化代謝有...

【評論主題】19.下列那一種腫瘤標誌的血清濃度被用來評估卵巢癌之指標?(A)CA 19-9 (B)Du-PAN-2 (C)CA125 (D)PAPP-A

【評論內容】(A)CA 19-9(胰臟癌)à胰臟及消★★★★★,...

【評論主題】14.集尿腎小管(Collecting tubule)的水分再吸收受下列何者調控?(A)ADH (B)PTH (C)ACTH (D)FSH

【評論內容】抗利尿激素ADH會作用在遠曲小管和集尿管...

【評論主題】2.兩個胺基酸結合形成一個雙肽過程中將脫去一個什麼分子?(A)CO2(B)NH3 (C)CO (D)H2O

【評論內容】兩個胺基酸透過peptide bond,...

【評論主題】【題組】34. Where was David an hour ago? ________

【評論內容】David 一小時前在哪裡回答需要回答地★ (...

【評論主題】【題組】33. When is Amy’s birthday party? ________

【評論內容】Amy的生日派對是在什麼時候?(AE) ........