問題詳情

47.關於聚合酶連鎖反應(polymerase chain reaction, PCR)的敘述,下列何者最不適當?
(A)根據目標基因的序列及預期的PCR產物長度,來設計適當的primer及反應時間與溫度
(B)PCR反應的第一步驟是denaturation,目的是要將雙股的DNA打開
(C)annealing的溫度與primer的序列組成有關
(D)所使用之鎂離子濃度若太高,則PCR產量會大幅降低

參考答案

答案:D
難度:簡單0.727
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濃湯】評論

MgCl2 氯化鎂:可提供鎂離子作為聚合酶的輔因子,一般都使1.5~2.0mM。若濃度太高,雖然可以增加PCR的產量,但是專一性會大幅降低。1. Denaturation:利用高溫(90~95℃)將雙股螺旋DNA 解離成單股DNA,再以單股DNA 作為複製的模板。2. Annealing:溫度降低到適當溫度(不同的primers 其annealing溫度會有不同),讓引子黏結到正確的目標基因位置。3. Extension:溫度調整到72℃,鎂離子作為酵素輔因子,讓DNA聚合脢依照模板上的密碼,開始將核酸原料(dNTPs)一個接著一個的加上去,合成另一股新DNA 片段。https://smallcollation.blogspot.com/2013/08/polymerase-chain-reaction-pcr.html#gsc.tab=0